糖络宁对糖尿病大鼠背根神经节线粒体DNA及电镜下线粒体结构的影响(3)
1.8 电镜观察线粒体结构运用透视电子显微镜对标本进行观察:组织固定,在“低温”条件下(0~4℃)操作,使用两步固定法,第1次固定使用戊二醛固定液,经过充分洗涤后,用锇酸作第2次固定,2次固定的时间相同,均为20 min;组织脱水:按照标准流程进行脱水:50%乙醇10 min,70%乙醇10 min,85%乙醇10 min,95%乙醇15 min,100%乙醇15 min,100%乙醇15 min,中间溶剂10 min;组织包埋:组织脱水后入中间溶剂,直接入纯丙酮与包埋剂混合液中开始浸透,接着包埋于新换的包埋剂于预先干燥的胶囊中聚合,后2次包埋剂不更换胶囊;超薄切片:使用超薄切片机切片,切出来的切片收集到有Formva支持膜的载网上,从水中捞起晾干,放入电镜中观察。
1.9 统计学方法
采用SPSS 11.5软件进行统计学分析。计量资料以均数±标准差(x±s)表示。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。以P < 0.05为差异有统计学意义 ......
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