[摘要] 目的 构建鼠源性乳腺癌5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药细胞株，为研究乳腺癌耐药与体内免疫微环境的关系提供细胞模型。 方法 通过体外以浓度递增的方法诱导小鼠乳腺癌4T1细胞对5-Fu产生耐药，MTS法确定其耐药性，平板克隆检测其增殖活性，实时定量和半定量PCR检测其中5-Fu代谢相关酶TS、MTHFR、TK、OPRT、DPD及药泵蛋白MDR1、MRP1的表达，通过流式细胞术检测其周期及CD44+CD24-干细胞亚群的比例。 结果 耐药细胞4T1/5-Fu与4T1细胞相比，4T1/5-Fu细胞对5-Fu、吉西他滨和顺铂耐药的耐药指数(RI)明显升高；5-Fu合成代谢相关酶TK、OPRT表达明显降低(P < 0.05)，代谢抑制性相关酶TS、MTHFR明显升高(P < 0.05)，药泵蛋白MDR1、MRP1表达明显升高(P < 0.05)；流式细胞术结果显示 ......