4 超声、微泡-质粒联合介导转染

    微泡直接作为核酸载体在声孔效应中有显著优势：核酸近乎瞬间被定位在细胞表面并转染入胞内。瞬时微孔只为胞内基因转染提供了有限的时间[7]，因此，通过静电作用将质粒或寡核苷酸锚在微泡的表面可提高转染效率。Unger等[25]首先报道了微泡表面放置正电荷的方法，他们成功改良了Definity微泡的制备，通过在较高相变温度下水溶性差的全氟丁烷气体在含水脂质混合物胶团内的超声弥散可提高微泡稳定性。微泡壳成分为DSTAP/二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)/聚乙二醇(PEG)硬脂酸盐[7]。每个微泡表面都能够锚定数千质粒分子[7]，对于分子量较小的寡核苷酸片段，每个微泡所能结合的数量将比前者高出几个数量级[26]。微泡及核酸间的静电作用可以通过调节孵育媒介的离子强度来控制[2]。显然，微泡与被络合保护的核酸联合可显著增强转染效率。

    Taylor等[27]的研究证实，将插入报告基因的病毒颗粒(逆转录病毒，慢病毒，腺病毒，腺相关病毒等)锚在微泡表面并超声辐照能够提供令人满意的转染效率。这种方法不仅能提高基因转染效率 ......