人参皂苷Rh2对B16黑色素瘤细胞侵袭、转移能力的影响(2)
细胞培养超净台(Healforce,中国,型号:TSJH-1212);CO2细胞培养箱(Thermo,美国,型号:Forma 310);倒置显微镜(奥林巴斯,日本,型号:IX70-81FZ)。1.2 方法
1.2.1 细胞培养 B16黑色素瘤细胞用含有10%灭活胎牛血清+1%青霉素+1%链霉素的RPMI-1640培养液在5%CO2 37℃的条件下进行培养,待细胞密度达到95%时以0.25%胰蛋白酶消化传代培养,取生长期良好的细胞。
1.2.2 药物处理 称取0.0156 g人参皂苷Rh2(人参皂苷Rh2分子式:C36H62O8,分子量:622.87)溶解于50 μL二甲基亚砜(DMSO)中,制成0.5 mol/L浓度的母液,于-20℃下分装冻存备用,临用前稀释。
1.2.3 细胞活力的检测 采用MTT法对细胞活力进行检测。取符合要求的细胞以每孔3 000个的密度接种于96孔板中,制成细胞悬液。24 h后加入不同浓度的人参皂苷Rh2(0、25、50、100 μmol/L) ......
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