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编号:12868363
紫草素下调Runx2转录活性对乳腺癌细胞体外运动能力的影响(3)
http://www.100md.com 2016年6月25日 《中国医药导报》2016年第18期
     1.9 蛋白提取和Western blot检测蛋白表达

    收集各处理组细胞,采用总蛋白提取试剂盒(碧云天,P0027)提取总蛋白,并测定含量。取等量蛋白在10%的SDS-聚丙烯酰胺凝胶中电泳,电泳结束后,转膜、封闭,加入一抗(1∶500)4℃孵育过夜,TTBS洗膜,将二抗按1∶1000稀释后与硝酸纤维素膜室温孵育1 h。经过2次洗涤后,加入显色剂显色、拍照。

    1.10 统计学方法

    应用SPSS 13.0统计软件包进行分析,计量资料采用均数±标准差(x±s)表示,采用单因素方差分析,方差齐性采用LSD检验,以P < 0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 SKN对MDA-MB-231细胞体外迁移能力的影响

    与空白组比较(图1A),经25 ng/mL EGF孵育24 h后,MDA-MB-231细胞向中央空白区域迁移的细胞数量显著增加(图1B)。而阳性对照药BB-94和SKN均可显著抑制MDA-MB-231细胞的这种迁移能力 ......
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