两种血管外膜成纤维细胞培养方法的比较与经验总结(3)
AFs原代培养时难免混杂少量的其他细胞，包括平滑肌细胞、内皮细胞、脂肪细胞等，利用AFs生长速度快、数优的特点，在传代培养过程中能排斥其他细胞而优先增殖，经过几代的传代生长后，能达到自然纯化的效果，得到较高纯度的AFs[18]。Vimentin是细胞骨架中间纤维家族成员，主要在成纤维细胞中表达；α-SMA主要表达于平滑肌细胞，所以可根据Vimentin表达阳性/a-SMA表达阴性来鉴定成纤维细胞。本项目中两种方法培养的细胞，使用免疫组化方法鉴定，可见Vimentin表达阳性/ a-SMA表达阴性，故而可以确定所培养的细胞为AFs。
原代培养第一次传代时机的掌握非常重要，一般认为选取细胞接近或完全融合成片时进行传代。贴块法原代培养时由于组织块的分布不均匀，且活性不一，导致细胞生长也不均匀 ......
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原代培养第一次传代时机的掌握非常重要，一般认为选取细胞接近或完全融合成片时进行传代。贴块法原代培养时由于组织块的分布不均匀，且活性不一，导致细胞生长也不均匀 ......
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