两种非整合载体重编程人脐带血CD34+细胞形成诱导多能干细胞的研究(2)

http://www.100md.com 2016年8月25日 《中国医药导报》2016年第24期

     1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    人脐带血(天津市中心妇产科医院提供，患者签署知情同意书)来源的CD34+细胞；小鼠成纤维细胞(MEF)；H1细胞系(天津血液病研究所保存)；pEB-C5(表达OCT4、SOX2、KLF4、c-MYC和LIN28)和pEB-Tg(SV40 Large T antigen)(Addgene公司)；pEV SFFV-OS(OCT4-2a-SOX2)，pEV SFFV-MK(MYC-2a-KLF4)和pEV SFFV-B(BCL-XL)(天津血液病研究所保存)；Human CD34+ cell nucleofection kit(Lonza公司)；Anti-TRA-1-60、Anti-SSEA4、Anti-OCT4、Anti-Nanog和Accutase(Stemgent公司产品)；引物对(Millipore公司)：hOct4上游引物5′-ATTCAGCCAAACGACCATCT-3′ ......