熊果酸对人结肠癌HT—29细胞增殖抑制和诱导凋亡的研究(2)
1.2 方法
1.2.1 细胞培养 用含10%新生小牛血清的RPMI-1640培养基于37℃、5% CO2的培养箱中培养HT-29细胞，每2～3天传代1次，用对数生长期的细胞进行实验。
1.2.2 MTT法检测UA对HT-29细胞的增殖抑制情况 将HT-29细胞调节浓度至5×104个/mL，加入96孔培养板中，待其贴壁后加入UA，使终浓度分别为10、20、30、40、50 μmol/L，并设立不含UA(0 μmol/L)的对照组，每组设3个复孔，各组中DMSO的最终含量均为0.5%(V/V)。将96孔板放在培养箱中分别培养12、24、36、48 h后加入5 mg/mL的MTT溶液20 μL，然后置于培养箱中继续培养4 h，弃上清，每孔加入DMSO 100 μL，震荡混匀后用酶标仪在570 nm波长下检测各孔的吸光值(OD值)。计算细胞增殖抑制率=[(对照组OD值-实验组OD值)/对照组OD值]×100%。
1.2.3 荧光显微镜观察细胞凋亡情况 将HT-29细胞接种于24孔培养板中，接种浓度为1.25×105个/mL ......
您现在查看是摘要页，全文长 4313 字符。
1.2.1 细胞培养 用含10%新生小牛血清的RPMI-1640培养基于37℃、5% CO2的培养箱中培养HT-29细胞，每2～3天传代1次，用对数生长期的细胞进行实验。
1.2.2 MTT法检测UA对HT-29细胞的增殖抑制情况 将HT-29细胞调节浓度至5×104个/mL，加入96孔培养板中，待其贴壁后加入UA，使终浓度分别为10、20、30、40、50 μmol/L，并设立不含UA(0 μmol/L)的对照组，每组设3个复孔，各组中DMSO的最终含量均为0.5%(V/V)。将96孔板放在培养箱中分别培养12、24、36、48 h后加入5 mg/mL的MTT溶液20 μL，然后置于培养箱中继续培养4 h，弃上清，每孔加入DMSO 100 μL，震荡混匀后用酶标仪在570 nm波长下检测各孔的吸光值(OD值)。计算细胞增殖抑制率=[(对照组OD值-实验组OD值)/对照组OD值]×100%。
1.2.3 荧光显微镜观察细胞凋亡情况 将HT-29细胞接种于24孔培养板中，接种浓度为1.25×105个/mL ......
您现在查看是摘要页，全文长 4313 字符。