异氟烷对新生小鼠神经元细胞外信号调节激酶和cAMP反应元件结合蛋白磷酸化水平的影响(2)
本实验采用神经细胞原代培养的方法,从细胞水平观察异氟烷对神经元ERK和CREB的影响,探讨异氟烷的神经毒性以及影响学习记忆能力的潜在机制。
1 对象与方法
1.1 主要材料
取24 h内新生的SPF级小鼠30只,雌雄不限,由辽宁医学院实验动物中心提供[动物许可证号:SYXK(辽)2009-0004]。DMEM培养基(美国Hyclone)、胎牛血清(FBS,浙江天杭生物科技有限公司)、神经元基本培养基(美国Introvigen)、p-CREB抗体(Cell Signal公司)、p-ERK1/2抗体(美国SANTA Cruz公司)、β肌动蛋白抗体和辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗(北京中杉金桥生物技术有限公司)、ECL发光试剂(美国Sigma公司)、Cell Titer-BlueTM Cell Viabiliy Assay试剂盒(美国Promega公司)。
1.2 小鼠大脑皮层神经元分离、培养及细胞分组
根据文献报道[8] ......
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1 对象与方法
1.1 主要材料
取24 h内新生的SPF级小鼠30只,雌雄不限,由辽宁医学院实验动物中心提供[动物许可证号:SYXK(辽)2009-0004]。DMEM培养基(美国Hyclone)、胎牛血清(FBS,浙江天杭生物科技有限公司)、神经元基本培养基(美国Introvigen)、p-CREB抗体(Cell Signal公司)、p-ERK1/2抗体(美国SANTA Cruz公司)、β肌动蛋白抗体和辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗(北京中杉金桥生物技术有限公司)、ECL发光试剂(美国Sigma公司)、Cell Titer-BlueTM Cell Viabiliy Assay试剂盒(美国Promega公司)。
1.2 小鼠大脑皮层神经元分离、培养及细胞分组
根据文献报道[8] ......
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