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编号:13070004
靶向抑制磷脂酰肌醇3 —激酶110β因子的表达对人胃癌细胞生长影响的实验研究(3)
http://www.100md.com 2016年12月15日 中国医药导报 2016年第35期
     1.6 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率

    在AGS细胞中,将转染PI3Kp110β-siRNA序列和NC-siRNA序列72 h的细胞以及空白对照组细胞用预冷的PBS洗涤2次;用无酚红的0.25%胰酶-EDTA消化,加入缓冲液制成细胞悬液,离心,予PBS洗涤2次,每组加入缓冲液400 μL;先后加入Annexin V-FITC和PI染色液各5 μL,室温避光放置15 min,上流式细胞仪检测细胞凋亡率。凋亡实验重复3次,取均值。

    1.7 统计学方法

    采用SPSS 15.0统计学软件进行数据分析,计量资料数据用均数±标准差(x±s)表示,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验,以P < 0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 小干扰RNA转染效率检测

    将带绿色荧光标记的阴性对照序列(siFAM-NC)转染人胃癌细胞株AGS,48 h后荧光显微镜下观察,见细胞质和胞核均有点状或小片状绿色荧光显示(图1A ......
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