1.2 方法

    分别用改进的Hirt's方法、试剂盒A(High Pure Viral Nucleic Acid Kit，Roche，批号：10227300)和试剂B(Mini BEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0，Takara，批号：AK2101Y)提取HAdV-7CQ1198病毒株全基因组，提取的基因组进行限制性内切酶酶切实验、细菌内同源重组实验和转染细胞拯救病毒实验。

    1.2.1 改良Hirt's法提取腺病毒基因组 按文献报道的Hirt's改良法提取HAdV-7CQ1198感染的细胞中提取腺病毒基因组，主要步骤为收集的感染细胞剧烈震荡分散，加入800 μL新鲜配制的裂解液(10 mmol/L Tris-HCl，10 mmol/L EDTA，pH 7.5，1%SDS，100 μg/mL Proteinase K)，37℃孵育1 h，往离心管中逐滴加入5 mol/L的NaCl溶液200 μL，混匀，冰浴1 h以上，离心半径6 cm，14 000 r/min离心5 min取上清 ......