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编号:13069046
三种不同腺病毒基因组提取方法对全基因组克隆构建的影响分析(3)
http://www.100md.com 2016年12月25日 中国医药导报 2016年第36期
     本研究首次用這两种试剂盒提取HAdV-7基因组,结果表明两种试剂盒均可以快速、简便、有效的从腺病毒感染细胞中提取病毒基因组,整个过程仅需30 min左右,没有使用有机试剂酚/氯仿,而且提取的病毒DNA量更多,从60 mm培养皿中可以提取多达15~35 μg的病毒基因组DNA,是Hirt's方法提取量的3~7倍。这两种试剂盒也可用于从细胞样品中提取其他种类的病毒全基因组,如疱疹病毒全基因组等。本研究用两种试剂盒方法提取的腺病毒DNA完整性好,可以用于限制性内切酶酶切实验,从60 mm培养皿中提取的病毒DNA可以进行多达35次酶切反应(1 μg/次),而Hirt's法可能只能进行5次左右的酶切反应。两种试剂盒方法和Hirt's法提取的腺病毒基因组都可以用于转染实验和细菌内同源重组实验 ......
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