乌苏里蝮蛇血凝酶的分离纯化和质量研究(2)
1.2 试药蛇毒(产自东北黑龙江省乌苏里蝮蛇蛇毒,采毒后经冷冻干燥备用,批号20150702);低分子量Maker(GE Healthcare,17-0446-01);IEF Maker(等电点范围pH3~10,16-39212-01)及两性电解质溶液均购自GE公司(批号9909-1504);标准分子量Maker(670、158、44、17、1.3 kD)(Sigma,P0061-11);标准人血浆(Standard Plasma,Siemens,2015-08-28);福林酚试液(Sigma,40N5589),其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 Sephadex G-50凝胶层析
Sephadex G-50凝胶层析柱,用pH 7.8,0.05 mol/L Tris-HCl缓冲液平衡。称取乌苏里蝮蛇蛇毒冻干粉1 g,溶解于2 mL上述缓冲液中,4℃、4000 r/min离心10 min,将上清液上样,流速0.3 mL/min,1 mL/管收集流出液 ......
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