1.2.3 免疫細胞化学染色后细胞计数 将放置有细胞爬片的24孔板随机分成两组：正常组、EphA4-FC组。抑制剂处理组加入250 nmol/L EphA4-FC，培养至第2天后处理。染色方法同前，做3次以上进行数据分析，每次实验每组细胞至少选取3张细胞爬片，每张爬片不少于20个视野，用来观察并计数统计NG2/Hoechst+细胞，计数按双盲原则进行。

    1.2.4 Western blot 将培养有OPC的培养皿随机分为两组：正常组、EphA4-FC组。抑制剂处理组加入250 nmol/L EphA4-FC，培养至第2天后处理。用细胞膜蛋白提取试剂盒(碧云天生物技术)提取各组细胞膜蛋白；测定蛋白浓度后制备蛋白样品；然后依次进行制胶，上样，电泳，转膜，封闭；孵育一抗(PDGFαR=1∶500，GAPDH=1∶3000)，4℃过夜；孵育二抗(HRP标记的山羊抗兔IgG=1∶10 000 ......