外源性硫化氢对大鼠睾丸缺血再灌注损伤的保护作用(2)
1 材料与方法1.1 试剂及器材
NaHS(H2S外源性供体)(Sigma公司);丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(南京建成生物工程研究所);原位细胞凋亡检测试剂盒(德国罗氏生物技术有限公司);Caspase-3,Bax、Bcl-2抗体(加拿大圣克鲁斯公司);免疫组化检测试剂盒(福建迈新公司)。
1.2 实验动物和分组
30只成年雄性Wistar大鼠,年龄约10周,体重250~300 g,购于湖北省疾病预防与控制中心。随机分为3组,每组各10只。实验前,所有大鼠饲养在恒定温度的房间(22±2)℃,给予相同的食物和水。所有大鼠经腹腔注射2%戊巴比妥钠(50 mg/kg)麻醉。对照组(A组):左侧睾丸行阴囊切口后缝合切口,不给予任何干预措施,8 h后麻醉取材;睾丸IRI组(B组):左侧阴囊切口,720°顺时针扭转睾丸,5-0丝线固定于阴囊皮肤,扭转2 h后睾丸恢复自然位置,再灌注6 h后麻醉取材;睾丸IRI+H2S干预组(C组):在B组基础上,再灌注前腹腔注射外源性H2S(100 μmol/kg ) ......
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