茶多酚对过氧化氢损伤PC12细胞抗氧化酶系统的影响(2)
1.1.2 实验溶液配制 TP:精确称取适量,用无血清的DMEM溶解成一定浓度的母液,过滤除菌,用无血清的DMEM稀释成终浓度为5、10、20 μmol/L的三种浓度,现用现配。H2O2:量取适量后过滤除菌,4℃避光贮存,用前用无血清的DMEM配置成所需浓度。1.2 方法
1.2.1 细胞培养与处理 PC12细胞2×105/mL孵育在50 mL培养瓶中,DMEM高糖培养基(含100 μg/mL链霉素、100 U/mL青霉素、10%胎牛血清),置37℃、5%CO2恒温培养箱内常规孵育,每24小时换培养液1次,每48小时约80%满瓶时传代[4-6]。取对数生长期PC12细胞,以每孔2×105/mL分别接种在96孔板(MTT实验)或6孔板中(SOD、MDA、GSH-Px测定实验),于37℃、5%CO2培养箱中进行培养,24 h内细胞达到80%~90%融合后,用DMEM孵育细胞24 h(含体积分数0.01% FBS),同步化细胞。TP(终浓度分别为5、10、20 μmol/L)预孵育细胞1 h ......
您现在查看是摘要页,全文长 4179 字符。