茶多酚对过氧化氢损伤PC12细胞抗氧化酶系统的影响(1)
[摘要] 目的 研究茶多酚(TP)对过氧化氢(H2O2)损伤大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞抗氧化酶系统的影响。 方法 PC12细胞用TP及H2O2处理(TP终浓度5、10、20 μmol/L，H2O2终浓度500 μmol/L)，以噻唑蓝(MTT)法观察细胞活力，试剂盒测定细胞内抗氧化酶系统超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平。 结果 500 μmol/L H2O2作用PC12细胞2 h，细胞出现明显损伤，细胞活力下降(P < 0.01)；细胞破碎后上清液中SOD、GSH-Px的活性下降，MDA的水平增高(P < 0.01或P < 0.05)；5、10、20 μmol/L TP预处理可降低受损PC12细胞MDA的水平，增加SOD、GSH-Px的活性(P < 0.01)。 结论 TP能提高受损PC12细胞抗氧化酶系统的作用。
[关键词] 茶多酚；PC12细胞；过氧化氢；抗氧化酶系统
[中图分类号] R421 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2017)03(a)-0020-04
Effects of tea polyphenols on antioxidant enzyme system in PC12 cells damaged by hydrogen peroxide
DENG Fengjun1 XIAO Ling1 YANG Yinyu1 WEN Xianghua2
1.Department of Pharmacy， Yiyang Medical College， Hu'nan Province， Yiyang 413000， China； 2.General Office， Stomatological Hospital Affiliated to Yiyang Medical College， Hu'nan Province， Yiyang 413000， China
[Abstract] Objective To explore the effects of tea polyphenols (TP) on antioxidase system in pheochromocytoma PC12 cells of rats damaged by hydrogen peroxide (H2O2). Methods PC12 cells was treated with TP and H2O2 (the final concentration of TP was 5， 10， 20 μmol/L， the final concentration of H2O2 was 500 μmol/L). The cell viability was detected by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay. The activity of antioxidase system superoxide dismutase (SOD)， malondialdehyde (MDA) and glutathion peroxidase (GSH-Px) in PC12 cells was measured by the kits. Results PC12 cells were treated with 500 μmol/L H2O2 for 2 h， which were damaged obviously and the celluar viability was decreased (P < 0.01)； besides， after disruption of cells， the activity of supernatant GSH-Px and SOD was reduced， and the MDA was increased (P < 0.01 or P < 0.05)； while 5， 10， 20 μmol/L of TP pretreatment could decrease the level of MDA and improve the activity of SOD and GSH-Px in the PC12 cells (P < 0.01). Conclusion TP can enhance the activity of antioxidase system in induced-injury PC12 cells.
[Key words] Tea polyphenols； PC12 cells； H2O2； Antioxidase system
茶多酚(TP)為绿茶的主要活性成分，有显著的抗氧化作用，作用于与自由基有关的酶，抑制氧化酶系，如抑制氧化酶黄嘌呤氧化酶系(XO)、细胞色素P2450环氧酶等，同时TP通过直接作用于自由基，再生或保护体内高效抗氧化剂、络合诱导氧化的过渡金属离子，能高效清除自由基，产生显著的抗氧化、抗炎等作用[1-3]。本研究用PC12细胞株作为体外实验的神经细胞，H2O2为诱导损伤剂，造成受损神经细胞体外损伤模型，从TP对抗氧化酶系统的影响等方面研究了TP对神经细胞体外损伤模型的作用。通过本研究，希望为TP用于神经组织损伤性疾病提供切实可信的实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试剂与仪器 高糖DMEM培养基(GIBCO公司，USA)，噻唑蓝(MTT，Sigma-Aldrich，USA)，二甲基亚砜(DMSO，UNI-CHEM公司)，胎牛血清(FBS，杭州四季青生物公司)；TP(98%，江西绿康公司)，过氧化氢(H2O2，汕头光华化学厂)，丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒(南京建成)。752型紫外分光光度计(上海第二分析仪器厂)，酶标仪(Model 680，Bio-RAD，USA)，超声波清洗器(中国华南超声波设备厂)，离心机(TGL-16aR，上海安亭科学仪器厂)，倒置相差显微镜(XDS-1B，Olympus，日本)。PC12细胞购自中国科学上海细胞生物学研究所细胞库，源于大鼠肾上腺嗜铬细胞。, 百拇医药(邓凤君 肖凌 杨吟宇 文向华)
[关键词] 茶多酚；PC12细胞；过氧化氢；抗氧化酶系统
[中图分类号] R421 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2017)03(a)-0020-04
Effects of tea polyphenols on antioxidant enzyme system in PC12 cells damaged by hydrogen peroxide
DENG Fengjun1 XIAO Ling1 YANG Yinyu1 WEN Xianghua2
1.Department of Pharmacy， Yiyang Medical College， Hu'nan Province， Yiyang 413000， China； 2.General Office， Stomatological Hospital Affiliated to Yiyang Medical College， Hu'nan Province， Yiyang 413000， China
[Abstract] Objective To explore the effects of tea polyphenols (TP) on antioxidase system in pheochromocytoma PC12 cells of rats damaged by hydrogen peroxide (H2O2). Methods PC12 cells was treated with TP and H2O2 (the final concentration of TP was 5， 10， 20 μmol/L， the final concentration of H2O2 was 500 μmol/L). The cell viability was detected by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay. The activity of antioxidase system superoxide dismutase (SOD)， malondialdehyde (MDA) and glutathion peroxidase (GSH-Px) in PC12 cells was measured by the kits. Results PC12 cells were treated with 500 μmol/L H2O2 for 2 h， which were damaged obviously and the celluar viability was decreased (P < 0.01)； besides， after disruption of cells， the activity of supernatant GSH-Px and SOD was reduced， and the MDA was increased (P < 0.01 or P < 0.05)； while 5， 10， 20 μmol/L of TP pretreatment could decrease the level of MDA and improve the activity of SOD and GSH-Px in the PC12 cells (P < 0.01). Conclusion TP can enhance the activity of antioxidase system in induced-injury PC12 cells.
[Key words] Tea polyphenols； PC12 cells； H2O2； Antioxidase system
茶多酚(TP)為绿茶的主要活性成分，有显著的抗氧化作用，作用于与自由基有关的酶，抑制氧化酶系，如抑制氧化酶黄嘌呤氧化酶系(XO)、细胞色素P2450环氧酶等，同时TP通过直接作用于自由基，再生或保护体内高效抗氧化剂、络合诱导氧化的过渡金属离子，能高效清除自由基，产生显著的抗氧化、抗炎等作用[1-3]。本研究用PC12细胞株作为体外实验的神经细胞，H2O2为诱导损伤剂，造成受损神经细胞体外损伤模型，从TP对抗氧化酶系统的影响等方面研究了TP对神经细胞体外损伤模型的作用。通过本研究，希望为TP用于神经组织损伤性疾病提供切实可信的实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试剂与仪器 高糖DMEM培养基(GIBCO公司，USA)，噻唑蓝(MTT，Sigma-Aldrich，USA)，二甲基亚砜(DMSO，UNI-CHEM公司)，胎牛血清(FBS，杭州四季青生物公司)；TP(98%，江西绿康公司)，过氧化氢(H2O2，汕头光华化学厂)，丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒(南京建成)。752型紫外分光光度计(上海第二分析仪器厂)，酶标仪(Model 680，Bio-RAD，USA)，超声波清洗器(中国华南超声波设备厂)，离心机(TGL-16aR，上海安亭科学仪器厂)，倒置相差显微镜(XDS-1B，Olympus，日本)。PC12细胞购自中国科学上海细胞生物学研究所细胞库，源于大鼠肾上腺嗜铬细胞。, 百拇医药(邓凤君 肖凌 杨吟宇 文向华)