血清中乙型肝炎病毒转录的检测在母婴垂直传播中的临床意义(2)
1 资料与方法1.1 一般资料
选择解放军第三〇二医院(以下简称“我院”)在2014年10月~2016年10月收治的40例HBsAg阳性的产妇及其新生儿作为研究对象,入院分娩的孕妇全部在初检时接受了HBV病毒学检测,HBeAg阴性/阳性分为HBeAg阳性组(21例)和HBeAg阴性组(19例)。新生儿中,男26例,女14例;HBeAg阳性组中,男11例,女10例;HbeAg阴性组中,男15例,女4例。本次试验符合我院医学伦理会的审核,全部患者均签署了关于本次试验的知情权同意书。两组一般资料比较,差异无统计学意义(P > 0.05),具有可比性。
1.2 方法
①孕26周时采集孕妇空腹肘部静脉血2 mL,待新生儿分娩后24 h后采集2 mL的股静脉血,静置0.5 h后采用给予低温离心处理,4℃,4000 r/min,离心20 min,将血清分离,按照高纯度病毒核酸提取试剂盒上的操作说明提取核酸。将其中poly(A)RNA替换成为tRNA,作为载体RNA[3]。②对目的核酸进行扩增,设置特异性引物,扩增病毒DNA采用50 μL反应体系,循环条件:93℃ 100 s,90℃ 40 s ......
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