AMP依赖的蛋白激酶/叉头转录因子O3a信号通路及氧化应激介导紫铆因诱导人食管癌细胞凋亡作用的研究(2)
1 材料和方法1.1 实验材料
人食管癌EC109细胞系购自中科院上海细胞库。Butein、Compound C购自Sigma-Aldrich公司(美国);抗p-FOXO3a抗体、抗FOXO3a抗体、抗Bim、抗Bax抗体购自Abcam公司(美国);抗p-AMPK抗体、抗AMPK抗体购自cell signaling technology公司(美国)。裸鼠购自中国医学科学院实验动物中心,合格证号:SYXK(京)2013-0019。
1.2 方法
1.2.1 细胞培养及细胞处理 食管癌EC109细胞在完全培养基中常规培养,并置于37℃、5%CO2的细胞培养箱中。置于37℃细胞培养箱中贴壁24 h,待细胞密度达到80%左右时换成无血清培养基处理12 h,然后给予相应处理。
1.2.2 细胞活力检测 以每孔1×105的密度接种到96孔板。将细胞分为Control组、25 μmol/L But组、50 μmol/L But组 ......
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