枸杞多糖对中波紫外线辐射后角质形成细胞炎症因子表达的影响(2)
1 材料与方法1.1 实验试剂
红果枸杞购自于青海德令哈市壹葉香茶行,HaCaT细胞株购自上海中乔新舟生物科技有限公司(批号:ZQ0044),胎牛血清(FBS)购于以色列BI(批号:1706126),PBS缓冲液购于北京索莱宝科技有限公司(批号:20160915),胰酶购于北京索莱宝科技有限公司(批号:20160817),青链霉素混合液购于北京索莱宝科技有限公司(批号:20160309),DMEM培养基购于以色列BI(批号:0033116),IL-1细胞因子ELISA测定试剂盒购自武汉华美生物工程有限公司(批号:E04620h),IL-6细胞因子ELISA测定试剂盒购自武汉华美生物工程有限公司(批号:E04638h)。
1.2 实验仪器
二氧化碳培养箱,上海力申科学仪器有限公司;TL20W/12飞利浦紫外线UVB灯管,上海杰图商贸公司;UV-340A UVB辐照度监示器,北京精密仪器商城;冷冻干燥机,ALPHAI-2,德国Christ公司;X-Mark·BIO-RAD酶标仪,BIO-RAD公司;手持匀浆仪,无锡沃信仪器有限公司。
1.3 枸杞多糖的提取
称取干燥后粉碎的红果枸杞粉末50 g,加三氯甲烷∶甲醇(2∶1)500 mL,60℃回流脱脂2次,每次40 min;过滤后滤渣加入80%乙醇500 mL,70℃回流脱小分子糖、苷类物质及黄酮类物质2 h ......
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