RNA干扰血管内皮生长因子受体2基因表达提高结肠癌细胞对奥沙利铂敏感性的研究(2)
1 材料与方法1.1 材料
奥沙利铂由江苏恒瑞医药有限公司生产(批号H20000337)。SiRNA转染试剂盒siPORT Lipid Transfection Reagent购自Ambion公司。脂质体转染试剂Lipofectamine 2000购自美国Invitrogen公司。四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测盒购自Sigma公司,ImProm-Ⅱ Reverse Transcription System购自Promega公司。Annexin V-FITC apoptosis detection kit凋亡检测盒和Cycle Test TTM Plus DNA Reagent Kit细胞周期检测盒均购自美国BD公司。兔抗人VEGFR2多克隆抗体购自美国Abbiotec公司。人结肠癌SW480细胞株购自美国ATCC公司,单层的贴壁生长。
1.2 方法
1.2.1 VEGFR-2 siRNA表达质粒的构建 参照GenBank上的VEGFR-2序列(NM_002253.2) ......
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