1 材料与方法

    1.1 制备BMP-2/PLGA载药微球

    将浓度为10 mg/mL，含100 mg BMP-2溶液与含500 mg的1.25 mL PLGA二氯甲烷溶液中进行超声乳化。然后加入1%聚乙烯醇(PVA)2 mL，形成混合溶液，再乳化30 s，形成双乳液。再将此双乳液加入到浓度为0.3% PVA，100 mL水溶液和2%异丙醇100 mL水溶液中，搅拌混匀1 h[7-8]。离心后收集合成的微球，去离子水洗涤两次，真空干燥，儲存于-80°C低温冰箱。

    1.2 检测BMP-2/PLGA载药微球的物理学性质

    将少量微球均匀的分散在玻片上，保证显微镜下每视野微球计数不少于200个，测定每个微球的大小，并画出微球的粒径分布图。扫描电子显微镜观察微球形态。在37℃条件下将10 mg的微球置于pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液5 mL中，分别在开始温育后的2 h、8 h、24 h、2 d、4 d、7 d、14 d、21 d和28 d，取样1 mL，与同等体积的缓冲液充分混匀，用ELISA法测定不同时间点的BMP-2的释放量。

    1.3 观察BMP-2/PLGA载药微球对体外培养BMSCs的作用

    分离中华田园犬BMSCs ......