磁珠核酸提取方法在血浆EBV—DNA实时荧光定量PCR检测中应用的性能评价(2)
1 材料与方法1.1 材料
1.1.1 血浆样本 选取2015年4月16日~2016年1月9日在福建省肿瘤医院首诊,经病理证实为鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的患者100例,男69例,女31例,年龄11~74岁;采集患者治疗前EDTA-K2抗凝血5 mL,室温静置30 min后,3000 r/min×5 min水平离心,收集上层分装,置于-80℃保存。
1.1.2 血红蛋白溶血液 取健康体检者EDTA-K2抗凝全血5 mL,严格按照EP7-A2[3]附录F1“渗透压致溶血程序”制备血红蛋白(Hb)溶血液,经血液分析仪测定Hb浓度平均值为86.67 g/L,制备完成后立即使用。
1.1.3 第三方定值参考物质 采用“EB病毒脱氧核糖核酸(EBV DNA)液体标准物质”(国家二级),购自广州邦德盛公司,其低、中、高值含量分别为(5.0±1.8)×103、(5.1±1.1)×104、(5.4±1.0)×105 U/mL[标准文号GBW(E)090679~GBW(E)090681] ......
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