曲古抑菌素A对抑郁模型大鼠行为及脑源性神经营养因子表达的作用研究(2)
1 材料与方法1.1 实验动物与分组
清洁级健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠60只,体重180~200 g,7~9周龄,由上海交通大学医学院实验动物中心提供(合格证号:中科动管第003号),自由进食饮水,实验前适应性饲养1周。1周后进行旷场实验评分,选取评分相近的大鼠40只,按随机数字表法将其分为四组:正常对照组、模型组、氟西汀组和曲古抑菌素A组,每组10只。
1.2 药物与试剂
曲古抑菌素A和盐酸氟西汀购自Sigma公司;磷酸化环磷腺苷反应元件结合蛋白(p-CREB)抗体、BDNF抗体和β-actin抗体购于Abcam公司;其他Western blot相关试剂均购自中国碧云天生物科技有限公司。
1.3 造模与给药
正常对照组每笼5只饲养,正常饮水进食,不给予任何刺激。其余各组采用CUMS结合孤养方法建立大鼠抑郁模型[8]。CUMS包含以下7种不同的刺激因子:①禁食24 h;②禁水24 h;③高速水平震荡5 min;④昼夜颠倒;⑤4℃冷刺激5 min;⑥45℃热刺激5 min;⑦夹尾5 min ......
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