芒柄花黄素对人膀胱癌细胞T739增殖、凋亡的影响及机制探讨(2)
1 材料与方法1.1 主要试剂及仪器
芒柄花黄素(Formononetin,纯度>98%)、二甲基亚砜(DMSO,纯度98%)、荧光染料Hoechst33258购自美国Sigma公司,RPMI-1640培养基、胎牛血清购自美国Hyclone公司,人膀胱癌细胞株T739由中科院上海细胞生物研究所提供,实验所用GSK-3β、Axin、β-catenin一抗均购自美国Santa Cruz Biotechnology公司,辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗小鼠IgG二抗为北京中杉金桥生物技术公司生产,CCK8试剂盒、V-FITC凋亡检测试剂盒购自上海碧云天研究所,总蛋白测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所,全自动酶标板分析仪由美国Bio-Rad公司生产,FACSAriaⅢ流式细胞仪由美国BectonDickson公司生产。
1.2 方法
1.2.1 细胞培养 人膀胱癌细胞T739在37℃、5% CO2环境下置于含10%胎牛血清(FBS)和100 U/mL青霉素、100 U/mL链霉素的RPMI-1640培养基培养 ......
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