1.1.2 主要培养基 LB、LS-LB、YPD、YPDS培养基，均参照Invitrogen公司提供的配方；BMY培养基[1%胰蛋白胨、2%酵母提取物、100 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 6.0)、1.34%酵母氮碱、4×10-5%生物素]。

    1.2 方法

    1.2.1 重组质粒pGAPZαA/rhCRP的准备与提取 前期已根据GenBank(X56214.1)数据库中公布的编码人CRP的基因序列及组成型载体pGAPZαA上酶切位点的特性设计并成功克隆出重组质粒pGAPZαA/rhCRP[15]。通过热击法将经测序鉴定的重组质粒pGAPZαA/rhCRP转化至大肠埃希菌感受态细胞JM109，然后涂布于含Zeocin 25 μg/mL的LS-LB固體平板上，37℃过夜培养。取阳性单克隆菌落进行接种，37℃、220 r/min过夜培养后提取重组质粒pGAPZαA/rhCRP，用XhoⅠ、XbaⅠ双酶切进行鉴定。

    1.2.2 重组质粒的酵母转化与表达鉴定 将经Bsp HI线性化的重组质粒pGAPZαA/rhCRP用电击法转化到酵母菌X-33中 ......