LOXP—DsRed—LOXP系统的构建及其应用(2)
[Key words] Cre recombinase； DsRed fluorescent protein； LOXP-DsRed-LOXP system； Colorectal cancerCre/Loxp系统所介导的重组反应仅依赖于Cre酶及其识别位点Loxp序列，不需要消耗能量及其他辅助因子的参与，同时没有种属特异性，因而被广泛应用于基因修饰及其功能鉴定的研究中[1-3]。近年来，多项研究成功应用慢病毒载体将Cre酶引入转基因鼠的特定组织，并在特定发育时期实现了特定基因的修饰，使得Cre/Loxp系统在小鼠疾病造模应用中取得突破性进展[4-8]。如Vaish等[9]成功应用慢病毒将Cre酶引入APCCKO鼠结直肠黏膜上皮细胞构建出了结直肠癌散发性癌灶模型。然而该系统在基因修饰过程中，Loxp位点所在的染色体构型、DNA甲基化程度及Cre酶的转录活性等都将影响重组效率，同时Cre酶对处于不同类型细胞和不同发育时期染色质中Loxp位点的识别能力不同，导致Cre酶在不同物种或同一物种的不同类型细胞或组织中介导Loxp位点发生重组的效率差异较大[10-11] ......
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