1.2 方法

    1.2.1 报告基因法

    取标准品，用测定培养液(含有10%胎牛血清的MEM培养基)稀释至每1 mL约含10 000 U，在96孔细胞培养板中做4倍系列稀释，共8个稀释度，每个稀释度做2孔。取供试品，用测定培养液稀释成每1 mL约含10 000 U，在96孔细胞培养板中做4倍系列稀释，共8个稀释度，每个稀释度做2孔。HEK293 puroISRE-Luc细胞在完全培养液(含有10%胎牛血清、2 μg/mL嘌呤霉素的MEM培养基)中贴壁生长，按1∶4传代，每周2～3次。取培养的细胞弃去培养液，用PBS洗1次后消化和收集细胞，用测定培养液配制成每1 mL含3.5×105～4.5×105个细胞的细胞悬液。将配制完成的标准品溶液和供试品溶液移入96孔细胞培养板中，每孔加入100 μL，然后将上述细胞悬液接种于同一96孔细胞培养板中，每孔100 μL。于37℃、5%CO2条件下培养18～24 h，小心吸净96孔细胞培养板中的上清液，按Bright-GloTM荧光素酶检测系统说明书加入细胞裂解液和荧光素酶底物 ......