1 材料与方法

    1.1 细胞和试剂

    胶质瘤细胞U251细胞株购于中国上海中科院细胞库；Tizanidine购于美国MCE公司；RPMI-1640培养液购自美国Hyclone公司；血清购自美国的Gibco公司；双抗购于美国SIGMA公司；0.25%胰酶消化液(EDTA)、CCK8-kit购于北京索莱宝科技有限公司；二甲基亚砜(DMSO)购于美国AMRESCO公司；RIPA蛋白裂解液、RIPA Lysis Buffer、BCA蛋白定量试剂盒、BCA Protein Assay Kit、蛋白酶抑制剂混合物Protease Inhibitor Cocktail购于北京康为世纪生物科技有限公司(CWBIO)；蛋白上样缓冲液，LDS Sample buffer购于美国Invitrogen公司；蛋白预染Marker购自美国Thermo公司；ECL显影液、一抗(bcl-2、bax、active-caspase3、CyclinD-1、P-70、tubulin)、HRP標记的羊抗兔/羊抗鼠二抗购于美国PTG公司；一抗(AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR)购于CST公司；TRANSWELL小室购于美国Millipore公司；Matrigel基质胶购于美国BD公司；Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒购于北京四正柏生物科技有限公司 ......