2.2 miR-96-5p抑制劑转染到血小板增加了血小板caspase-3活性

    天冬酰胺特异酶切的半胱氨酸蛋白酶(caspases)与凋亡效应器，细胞色素C和Bcl-2蛋白家族间相互作用参与细胞凋亡的调控和执行，是影响细胞凋亡的重要因素。其中caspase-3在凋亡的执行阶段起作用。应用检测蛋白水解酶活性的手段可以比其他方法更早检测到凋亡。caspase-3可以裂解交联在底物DEVD上的荧光物质AFC使其释放再通过荧光比色法检测反应体系中的荧光强度间接反映蛋白酶的活性。

    实验设置4组复孔，设置未经转染的血小板为空白对照组、转染miRNA抑制物对照物组为阴性对照、转染miR-96-5p的为抑制剂组。测定caspase-3活性[9]的结果表明，与miRNA抑制剂对照物比较，200 nmol/L miR-96-5p的抑制剂转染到血小板72 h后，caspase-3的活性显著上升(P < 0.01)(图2) ......