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编号:13241794
三种人工阴道成形术后阴道优势菌群和乳酸杆菌调查(2)
http://www.100md.com 2018年2月15日 《中国医药导报》 2018年第5期
     l 资料与方法

    1.1 一般资料

    收集2014年1月~2016年1月于我院行结肠代阴道、皮肤代阴道及COOK生物补片代阴道术的患者各12例。所有患者均存在先天性阴道发育异常,如MRKH综合征、睾丸女性化综合征、先天性肾上腺皮质增生及先天性阴道闭锁,此外还有外伤后阴道狭窄畸形、阴道恶性肿瘤及宫颈恶性肿瘤术后的阴道再造。

    1.2 研究方法

    分别于术后1个月、术后6个月及术后1年取各组患者阴道侧壁上1/3的分泌物,取样时避免标本污染,将分泌物涂板于血平板及中国蓝培养基,放于37℃恒温培养箱中培养18~24 h,挑选平板上生长菌落行革兰染色,根据革兰染色结大肠埃希菌果,将阳性菌接种于GPI卡、阴性菌接种于GNI+卡,应用法国生物梅里埃有限公司生产的VITEK 2 COMPACT全自动微生物鉴定仪分析得出细菌种类。由于此种方法无法检测乳酸杆菌,故还需将患者的阴道分泌物与生理盐水尽可能混匀后,将标本接种于MRS琼脂培养基上,放入37℃恒温培养箱中培养48 h,将生长菌落行革兰染色并观察细菌形态,如为革兰阳性杆菌、无芽孢、无动力,则初筛为乳酸杆菌菌落,再将菌落放入MRS液体培养基进行增菌,放入37℃恒温培养箱中培养48 h,之后再次接种于MRS琼脂培养基上分离培养,再次增菌、平板分离,如此重复15个循环后得到纯化的菌株,送往杭州百思生物技术有限公司通过API 50CH/CHL生化鉴定最终确认是否为乳酸杆菌 ......
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