2.5.3 最优提取工艺验证试验 按处方规定量称取黄芪、麦冬药材，共3份，依据确定的最优工艺参数进行验证试验，结果总皂苷的含量分别是7.036、7.235、7.195 mg/g，均比正交试验中的9组高，表明该研究确定的工艺稳定、可行。

    3 讨论

    比色法是测定总皂苷含量的经典方法[17-20]。常用的有香草醛-冰醋酸-高氯酸、香草醛-浓硫酸以及高氯酸三种显色方法[21]。本研究就曾通过比较三种方法的优劣，选择香草醛-冰醋酸-高氯酸为最佳的显色剂。原因是香草醛-浓硫酸法显色不稳定，重现性差，测定数据误差大，所以不能用于定量分析。而以高氯酸为显色剂时，黄芪甲苷标准品溶液最大吸收波长与黄芪麦冬提取液的最大吸收波长相差很多。香草醛-冰醋酸-高氯酸法，反应灵敏，黄芪甲苷标准品溶液与黄芪麦冬提取液的在470 nm处都有较强吸收，且重现性良好，因此选用此种显色剂和黄芪甲苷为标准品来测定总皂苷的含量。

    总皂苷采用比色法进行含量测定时，对所需试剂的温度及时间对其影响较大[22] ......