mTOR信号通路在心肌肥大中的作用(2)
1 材料与方法1.1 实验对象和主要试剂
SD大鼠(南方医科大学实验动物中心,合格证号:44002100011714);H9c2心肌细胞(美国标准生物品收藏中心);NE(中国远大医药公司);P-mTOR抗体、mTOR抗体和GAPDH抗体(美国Cell Signaling Technology公司)。本研究动物实验获广州医科大学附属第二医院伦理委员会批准实施。
1.2 动物分组及处理
将16只10~12周龄雄性SD大鼠随机分为两组,每组8只。AAC组采用AAC建立压力超负荷性心肌肥厚大鼠模型,具体术式参考文献[5]并略有改进。假手术组采用相同术式,但不结扎腹主动脉。术后2周行超声心动图检查,并以此判断心肌肥厚大鼠模型是否建立成功。此后处死大鼠,留取心脏组织以备后续分子生物学研究需要。
1.3 超声心动图检查
经10%水合氯醛腹腔注射麻醉后,大鼠取左侧卧位,采用连接30 MHz高频探头的超声诊断仪(飞利浦IE33)经胸前壁进行二维超声检查。记录的超声心动图指标主要包括左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室舒张末期后壁厚度(LVPWd)、室间隔舒张末期厚度(IVSd)、左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS) ......
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