1.2 方法

    1.2.1 血液标本采集及处理 所有受检者需空腹6 h以上，静脉采血3～5 mL，37℃水浴30 min后以3000 r/min离心10 min，取上清液-70℃保存待用。

    1.2.2 TK1检测 采用酶免疫点印记化学发光法，仪器及配套试剂盒由深圳市华瑞同康生物技术有限公司提供，试剂批号为NT1170707B。检测步骤：①配制实验所需的稀释液、洗涤液、封闭液。②将内含硝酸纤维素膜的模板平放在一张干净的滤纸上，不同浓度的校准品按1、2、3号的顺序，点样到A1、A2及A3位置上，每孔3 μL，待检样品血清按每孔3 μL顺序点在膜上后面的其他位置，室温下自然晾干30～60 min膜干透至自然翘起。③打开模板将膜放入反应盒内，用去离子水振摇洗膜2次，每次1 min。④弃去洗液，加入配好的封闭液，室温下振摇封闭30 min。⑤加入一抗，室温下振摇反应120 min。⑥弃去抗体反应液，用洗涤液迅速漂洗2次后，振摇洗涤3次，每次5 min。⑦加入生物素化二抗，室温下振摇反应40 min。⑧弃去抗体反应液，用洗涤液迅速漂洗2次后，振摇洗涤3次，每次5 min。⑨加入辣根过氧化物酶，室温下振摇反应60 min。⑩弃去反应液，用洗涤液迅速漂洗2次后 ......