1.2.4 ELISA法检测VEGF蛋白表达 取100 mg液氮保存的软骨组织，置于经液氮预冷不锈钢管；用钢制小锤在液氮中将组织标本击碎，研磨至粉状。粉末置于溶液中(150 mmol/L NaCl，20 mmol/L Tris HCl buffer，pH7.4)，充分溶解后，48 000 g，4℃，离心60 min，取上清，VEGF的ELISA试剂盒进行检测，实验重复3次后，进行统计分析。

    1.3 统计学方法

    采用SPSS 13.0统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差(x±s)表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验；相关性分析采用Pearson检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 软骨组织的Mankin评分和分组

    采用番红O溶液对软骨组织进行染色，改良的Mankin评分标准对OA关节软骨进行分组，结果显示，本研究中40例OA患者分为轻度退变组11例 ......