1 材料与方法

    1.1 主要试剂

    本实验主要涉及Western blot、实时定量PCR以及细胞侵袭四大部分实验，主要试剂如下：DEME培养基(杭州四季青生物工程材料有限公司)；胰蛋白酶(上海源叶生物科技有限公司)；BCA蛋白分析试剂盒(Thermo公司)；LRG-1、LGR-5、β-acting抗体(美国Abcam公司)；荧光二抗(华拓生物科技股份有限公司)；Trizol裂解液(美国invitrogen公司)；Matrigel胶(美国Becton-dickinson公司)。

    1.2 实验方法

    1.2.1 细胞培养 将HT29、CD151--HT29放入细胞培养瓶中培养，以含有10%胎牛血清的DMEM培养基进行细胞培养，采用倒置显微镜观察细胞生长状态。待细胞长满时进行细胞传代，将培养瓶中的培养基除去，使用PBS溶液清洗2～3次，再加入1 mL胰酶进行细胞消化5 min后，加入培养基稀释胰酶停止消化，使用吹打管吹打培养基将培养瓶壁上的细胞吹打至培养基中 ......