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编号:13297953
lncRNA ANRIL在乳腺癌中的作用及机制研究(2)
http://www.100md.com 2018年6月5日 《中国医药导报》 2018年第16期
     1.2 MTT法检测细胞增殖

    收集对数生长期的细胞以每孔5000个细胞的密度接种于96孔板,贴壁后24 h内完成转染si-ANRIL或si-p53,每24小时检测1次增殖情况,连续检测至96 h。检测方法:每孔加10 μL的MTT溶液(5 mg/mL),孵育4 h,弃掉上清,每孔加150 μL的DMSO,振荡、融解,于酶标仪(Tek Elx800,美国Biotek)上测量490 nm波长吸光值(OD490 nm)。本研究中细胞分组为:对照组(即si-CON组)、si-ANRIL组、si-p53组和si-ANRIL+si-p53组。

    1.3 Transwell实验检测细胞侵袭能力

    将-80℃保存的BD基质胶取出,4℃过夜。取300 μL空培养液,加入60 μL基质胶,混匀,加入上室,在37℃无菌条件下放置6 h,使ECM胶充分凝固;消化细胞,制成细胞悬液,在凝固后的上室中每孔种2×105个细胞。下室加入含10%血清的无抗生素培养基 ......
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