裸花紫珠提取物对银屑病作用及机制研究(2)
1 材料与方法1.1 实验动物
清洁级KM小鼠,体重18~22 g,北京维通利华实验动物技术有限公司提供。许可证号:SCXK(京)2012-0001。将60只小鼠经适应性喂养7 d后(饲养室温度20~25℃,相对湿度50%~65%)。
1.2 实验材料
1.2.1实验试剂
甲氨蝶呤片(MTX,上海信谊药厂有限公司),Caspase3、Cleaved-Caspase3、Bax、BCL-2抗体(Cell Signaling公司,美国),Caspase3、BCL-2、Bax mRNA引物(Pall Life Science公司,美国),RNA逆转录试剂盒(Invitrogen,USA),SYBR Green PCR Master Mix(Invitrogen,USA)。
1.2.2裸花紫珠提取物
裸花紫珠药材(产地为海南,经中国科学院华南植物园华南植物鉴定中心叶华谷研究员鉴定为裸花紫珠Callicarpa nudiflora,标本现存于中国科学院华南植物园标本馆)。裸花紫珠提取物制备方法:裸花紫珠干燥叶4 kg经80%乙醇加热回流提取3次 ......
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