1.8 观察艾灸对实验大鼠压力性损伤创面组织的病理形态学改变的影响

    1.8.1 标本采集 分别将模型组和艾灸组大鼠于治疗1 d、3 d、5 d、7 d、10 d后进行标本采集，空白组大鼠随同以上两组于上述5个时间点取材处理。标本采集前对所有大鼠体重测定，根据体重不同分别给予对应的水合氯醛进行腹腔注射麻醉，取材区域为以压力性损伤创面正中心为圆点，5 mm为半径的皮肤全层组织。取材过程中注意勿将组织打卷，展平固定在滤纸中，置于包埋盒中，贮存在盛有10%的中性甲醛溶液，24 h内做包埋处理，标本采集后的所有大鼠脱颈椎处死。

    1.8.2 包埋及HE染色步骤 包埋：采集后的标本置入已标号的新包埋盒。60%乙醇、80%乙醇、95%乙醇、100%乙醇Ⅰ、100%乙醇Ⅱ，依次进行酒精梯度脱水。酒精和二甲苯等量混合及二甲苯浸泡，透明处理。在二甲苯和石蜡等量混合、石蜡Ⅰ、石蜡Ⅱ进行浸蜡处理，包埋成块。HE染色：①切片≤4 μm。②常规二甲苯脱蜡处理切片，梯度酒精脱水处理：二甲苯Ⅰ 5 min → 二甲苯Ⅱ 10 min → 无水乙醇Ⅰ 2 min → 无水乙醇Ⅱ 2 min → 95%乙醇1 min → 80%乙醇1 min → 75%乙醇1 min。③蒸馏水冲洗1 min。④苏木精染色5 min → 冲洗 ......