酶辅助闪式法提取莲蓬中原花青素的工艺研究(2)
2 方法与结果2.1 对照品的制备
精密称取原花青素对照品10.5 mg,置于10 mL容量瓶,用甲醇定容,摇匀,得1.05 mg/mL的原花青素对照品贮备液,备用。
2.2 供试品溶液的制备
采用闪式提取法[21]。将新鲜莲蓬用干燥箱烘干,干品过40目筛,准确称取该干莲蓬粉10 g,放入锥形瓶中,加入纤维素酶,酶量为2%,加适量水,50℃酶解1 h,放入提取罐中,按一定的料液比加入提取溶劑,称量,闪式提取一定时间,用提取液补足减少的重量,过滤,得莲蓬提取液,精密移取该品1 mL于100 mL容量瓶中,甲醇定容,摇匀,得供试品溶液。
2.3 原花青素标准曲线的绘制
精密移取贮备液,配置成浓度为0.0525、0.105、0.1575、0.210、0.315、0.630 mg/mL的系列对照品溶液。精密移取上述对照品溶液和空白对照(甲醇溶液)各1 mL,分别置于10 mL容量瓶中,加入质量分数为3%香草醛-甲醇溶液3 mL和浓盐酸溶液1.5 mL,摇匀,在25℃条件下避光显色30 min,取出,用空白对照调零,使用紫外可见分光光度计在500 nm处测定吸光度值(A)。以A为纵坐标,以溶液浓度(C)为横坐标,绘制原花青素标准曲线。得线性回归方程:A = -0.1300+3.653C,线性范围为0.0525~0.315 mg/mL,r = 0.9997,线性关系良好 ......
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