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编号:13275759
高效阴离子交换色谱—脉冲安培检测法用于重组人促红素中唾液酸的含量测定(1)
http://www.100md.com 2018年9月25日 《中国医药导报》 2018年第27期
高效阴离子交换色谱—脉冲安培检测法用于重组人促红素中唾液酸的含量测定,高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法
     [摘要] 目的 建立高效陰离子交换色谱-脉冲安培检测法(HPAEC-PAD)测定重组人促红素(rhEPO)中唾液酸含量的方法。 方法 将rhEPO样品用5 mmol/L的磷酸盐缓冲液(pH 7.0)换液后,调整浓度到0.33 mg/mL,取20 μL样品溶液加入10 mU/μL的神经氨酸酶20 μL,37℃孵育1 h后,加入0.04 mmol/L的尤罗索尼克酸(KDN)内标物50 μL,再加入70 μL超纯水,混匀后分析测定。采用CarboPac PA1分析柱,CarboPac PA100保护柱,流动相为150 mmol/L氢氧化钠与125 mmol/L乙酸钠混合溶液,柱温30℃,流速1.0 mL/min,等度洗脱,数据采集时间15 min。根据唾液酸峰面积与KDN内标峰面积的比值与含量的量效关系 ......
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