下调人质膜型唾液酸酶对前列腺癌PC—3细胞增殖、侵袭能力的影响及其机制(3)
1.8 Transwell检测pGCsi-Neu3质粒对细胞迁移、侵袭的影响Transwell细胞迁移实验[20]按照ECM550系列迁移实验操作说明,将200 μL含有5×104个细胞的IMDM无血清培养基混悬液加入Transwell上室,下室加入600 μL含有10%FBS的培养基,培养24 h后,多聚甲醛固定,結晶紫染色,于倒置显微镜选取3个视野拍照记录,选用浓度为33%醋酸进行结晶紫脱色,洗脱液混匀后在酶标仪上595 nm测其OD值,间接反映细胞数。该实验重复3次。Transwell细胞侵袭实验[20]:上室加入40 μL的1︰7无血清培养基稀释的Matrigel胶,37℃细胞培养箱过夜,于次日进行迁移实验。其固定、染色、拍照、洗脱等实验步骤参照Transwell迁移实验。该实验重复3次。
1.9统计学方法
采用SPSS 16.0统计学软件进行数据分析,计量资料用均数±标准差(x±s)表示 ......
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