重组表达泛素化HBcAg融合基因和Tapasin基因的慢病毒的包装及鉴定(3)
2 結果2.1 Ub-HBcAg目的基因的PCR扩增结果
2.2 重组克隆的菌落PCR鉴定结果
2.3 重组表达载体质粒pLenti-CMV-Ub-HBcAg-HA-T2A-Tapasin-3Flag-P2A-EGFP的基因测序
将化学合成的T2A-Tapasin基因插入至构建好的载体,得到目的载体质粒pLenti-CMV-Ub-HBcAg-HA-T2A-Tapasin-3Flag-P2A-EGFP,基因测序,插入目的基因Ub-HBcAg和Tapasin的序列正确,表明成功构建了重组表达载体质粒。
2.4 重组慢病毒LV-Ub-HBcAg/Tapasin的滴度测定
LV-Ub-HBcAg/Tapasin感染293T细胞并收取细胞用于DNA提取及定量PCR,基于2-ΔΔCt法计算出病毒基因组数量和细胞基因组数量的比例 ......
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