[摘要] 目的 构建和包装稳定表达泛素化HBcAg融合基因和Tapasin基因的重组慢病毒，为慢性乙型肝炎免疫治疗的实验研究奠定基础。 方法 设计引物通过聚合酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因Ub-HBcAg，Ub-HBcAg基因与经酶切线性化的慢病毒表达载体质粒pLenti-CMV-HA-3Flag-P2A-EGFP定向连接，其产物pLenti-CMV-Ub-HBcAg-HA-3Flag-P2A-EGFP转化大肠杆菌菌株DH5α感受态细胞，挑选阳性克隆进行PCR鉴定和直接测序序列分析。将化学合成的T2A-Tapasin基因插入至pLenti-CMV-Ub-HBcAg-HA-3Flag-P2A-EGFP，其产物pLenti-CMV-Ub-HBcAg-HA-T2A-Tapasin-3Flag-P2A-EGFP经直接基因测序分析后与包装质粒pLP1、pLP2以及包膜质粒pLP/VSVG共转染人胚肾293T细胞 ......