N-乙酰半胱氨酸改善高脂高糖联合缺氧/复氧致H9C2心肌细胞损伤的实验研究(2)
1 材料与方法1.1 细胞及试剂
H9C2大鼠胚胎心肌细胞购自武汉大学细胞典藏中心。活性氧(ROS)試剂盒(批号:170824)、JC-1试剂盒(批号:170904)、Cell Counting Kit-8(CCK-8)(批号:170716)均购自中国碧云天公司;PE/7-AAD试剂盒(批号:7026588)购自美国BD公司;BMAL1抗体购自美国Novus公司;β-actin抗体购自美国Cell Signaling Technology(CST)公司;羊抗兔二抗购自美国Li-cor公司;NAC试剂购自美国sigma公司;荧光显微镜来自奥林巴斯公司。
1.2 方法
1.2.1 H9C2大鼠心肌细胞的培养 使用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养H9C2细胞。实验前去血清培养24 h,使细胞同步化,然后对心肌细胞分别进行如下处理:对照组(N组)培养基中含5.5 mmol/L葡萄糖、20 mmol/L甘露醇 ......
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