Genistein对雌性大鼠卵巢颗粒细胞FSHR基因表达的影响(2)
1 对象与方法1.1 实验动物
25~28日龄健康雌性SD大鼠,体重60~80 g,由哈医大附属二院实验动物中心提供。实验动物的使用许可证号为(黑)2013-002。
1.2 主要儀器及试剂
PCR扩增仪(PTC-100型,美国MJ.Research);GIS凝胶成像系统(上海天能科技有限公司)。Genistein、17β-雌二醇(17β-E2)及ICI 182,780(美国Sigma);Trizol(美国Invitrogen);BcaBESTTM RNA PCR Kit(大连Takara);引物(上海英骏生物公司合成)。
1.3 细胞培养
于实验大鼠颈部皮下注射孕马血清促性腺激素(PMSG,60 U/只),48 h后急性断头处死,立刻剥离出双侧卵巢,小号针头反复刺破卵泡并反复吹打,充分释放出颗粒细胞,200 μm滤网去除多余残渣后 ......
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