1.3.5 细胞流式仪检测细胞凋亡 取消化好的各组心肌细胞，吸入流式检测管中，离心半径13.5 cm，1000 r/min，离心5 min，弃上清，PBS洗2次。用400 μL 1×Binding Buffer悬浮细胞(浓度大约为1×106 cells/mL)。在细胞悬液中加入5 μL Annexin V-EGFP，轻轻混匀后于4℃避光条件下孵育15 min。加入10 μL PI后轻轻混匀，于4℃避光条件下孵育5 min。在1 h内用流式细胞仪检测。

    1.3.6 Western blot检测 细胞加裂解液冰上裂解30 min，离心半径13.5 cm，10 000 r/min，4℃离心10 min。留上清。采用BCA法测定各样品蛋白浓度。常规SDS-PAGE电泳及蛋白电转。转膜后的PVDF膜用5%脱脂奶粉溶液室温封闭1 h;TBST洗膜5 min，3次。滴加相应的一抗稀释液(APJ 1∶1000;β-actin 1∶1000)4℃过夜;TBST洗膜5 min ......