Western blot检测ACE2的蛋白表达：在50 mg心脏组织中加入500 μL裂解液，液氮条件研磨并提取总蛋白，按照BCA蛋白定量试剂盒的使用说明进行蛋白定量，然后将蛋白按照10 μL/孔进行上样，电泳转膜过后，用5%脱脂奶粉封闭孵育1 h。一抗稀释(1∶1000)后置于4℃冰箱孵育过夜。第2天以TBST洗涤3次后，加入辣根过氧化物酶标记的二抗(1∶10 000)，然后在室温下摇床孵育40 min。TBST洗膜3次后，滴加ECL并静置3 min后曝光显影，使用Gel Image system ver.4.00软件对所得条带进行分析，计算其灰度值，内参为GAPDH。

    ELISA法检测ANP、Ang(1-7)和AngⅡ的蛋白表达：以3000 r/min(离心半径13.5 cm)将心肌组织离心匀浆，10 min后取上清液，分装后-20℃保存备用。严格按ELISA试剂盒说明书检测心肌组织匀浆中ANP、AngⅡ和Ang(1-7)的蛋白含量。

    1.5 统计学方法

    运用SPSS 20.0软件对所得数据进行统计分析 ......