1.4.4 心肌梗死面积的测定 再灌注结束后再次结扎冠状动脉左前降支，于主动脉根部注射3%的伊文斯蓝2 mL，待心脏染色均匀后迅速摘除心脏。沿房室沟将心脏切片，每片厚约2 mm。切片置于1% 2，3，5-三苯基氯化四氮唑(2，3，5-triphenyltetrazolium chloride，TTC)中37℃孵育15 min，梗死心肌组织不染色呈白色，正常心肌组织染成蓝色，缺血心肌组织染成砖红色。用Image J软件测量并计算梗死区总面积(infarct sizes，IS)占缺血区总面积(area at risk，AAR)的百分比(IS/AAR)。

    1.4.5 Western blot法检测心肌HMGB1、TLR4、NF-кB的蛋白表达 取40 μg心肌组织蛋白样品，经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、转膜至聚偏氟乙烯膜上，加入相应稀释倍数的一抗(HMGB1、TLR4、NF-κB的抗体体积比分别为1∶1000、1∶2000、1∶500) ......