1.3 方法

    1.3.1 组织芯片蜡块的制备 先包埋出平整的空白蜡块，选择直径1.5 mm的空心穿刺针，在空白蜡块穿刺出56个孔位，再将供体蜡块上选取的肿瘤组织和对应的瘤旁正常脑组织各穿刺1个芯柱，纳入空白蜡块相应的孔位，压平，使所有芯柱尽量保持在一个平面，穿刺结束的芯片蜡块放入23 mm×23 mm大小的包埋模具内，置50℃恒温箱内烘烤30 min后重新注蜡包埋。

    1.3.2 免疫组化染色 组织芯片蜡块按3 μm厚度切片，60℃恒温箱烤片2 h，采用罗氏BenchMark XT全自动免疫组化仪进行染色。采用已知阳性对照片作为阳性对照，磷酸盐缓冲溶液(PBS)代替一抗作为阴性对照。由2名病理医师对染色结果进行判读。依据Beesley分级法[2]，以肿瘤细胞核表达棕黄色及所占的比例作为阳性染色的标准。根据染色强度以无染色、浅黄色、棕黄色、棕褐色分别计0、1、2、3分;根据阳性细胞占所有肿瘤细胞的比例≤5%、>5%～25%、>25%～50%、>50%～75%、>75%分别计为0、1、2、3、4分;两项分值相乘 ......